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奇異球菌錳依賴性細胞分裂缺失突變株之特性分析
Thesis

奇異球菌錳依賴性細胞分裂缺失突變株之特性分析

黃敏秀
Masters, National Tsing Hua University
1995

Abstract

奇異球菌,轉形,錳依賴性細胞分裂 D. radiodurans, transformation, Mn-CD
奇異球菌除了對游離輻射具有非常高的抗性外,它對於其他造成 DNA傷害的試劑,也非常具有抗性。很多的報告指出奇異球菌的高抗性,是因為它有高效率且正確的修補能力。奇異球菌除了上述的特徵外,它也有特殊的錳誘發的細分裂現象;加少量錳於靜止期的細胞培養液,可以剌激細胞再次分裂。最近我們實驗室分離了五株加錳不會誘發細胞再次分裂的突變株(Mn- CD-)。同時我們發現,用 wild-type Mn-CD+ 的 whole genomeDNA 轉形 (transformation)到其中一株 Mn-CD- 的突變株後,用 MMC(Mitomycin C)當做 selection marker 時,可以得到全部都是Mn-CD+ 的轉形株。因此,我們就對調控 Mn-CD 的基因與 MMC sensititvity 的關係非常感興趣。為了更進一步確定 MMC sensitivity 與 Mn-CD 的關係,在這個實驗中,我們用 Mn-CD+ 的菌株的 genomic DNA 轉形到 Mn-CD- 的五株 Mn-CD缺失的突變株,發現均可得到全部都是 Mn-CD+ 的轉形株,然而我們發現所有的 Mn-CD- 的突變株對於 MMC 的最小抑制濃度( MIC) 及存活實驗 Survival)中的結果都是較為敏感的。另外,從 Mn-CD- MMCresistance的菌落中找到 Mn-CD+ 的回復株,且所有 MMCr 的菌落都是Mn-CD+ 的表現型,由以上的結果,我們推測調控 MMCr 與調控 Mn-CD 基因可能是同一個。另外,從細胞存活曲線可知,部分調控 Mn-CD 的基因同時參與了 UV, gamma-ray, 及MMC的 repair,我們推測 UV, gamma-ray,MMC repair的過程中 有一個共同的調控步驟。

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