Abstract
本研究藉由低濃度亞砷酸鈉及利用 BrdU-UV visible light enrichment 的方法處理3x10 經致突變劑 Ethylnitrosourea (ENU) 處理過的中國倉鼠卵巢細胞，並從其中篩選出對亞砷酸鈉敏感的細胞株。從全部挑出的197 個細胞聚落中，篩選到14個對亞砷酸鈉敏感性較CHO-K1細胞有1.5 倍以上的細胞株。並對其中敏感程度表現較高的兩個細胞株(B26,D21) 作進一步的特性分析。由細胞聚落形成法得知，此二株細胞對亞砷酸鈉敏感的程度分別為CHO-K1細胞的３倍以及７倍。為了進一步探討亞砷酸鈉對此二株細胞造成的基因，我們檢查了此二細胞中麩胱甘胜(GSH) 的含量及麩胱甘胜轉移脢(GST) 的活性。雖然GSH 和GST 被証實可能和解除砷化物對細胞造成的毒性有關，但在B26 及D21 細胞中並未發現此二株細胞內GSH 含量及GST 的活性和CHO-K1細胞有所差異。另一方面，本研究利用原子吸收光譜法測定細胞受到亞砷酸鈉處理過後，細胞內累積砷化物的情形。結果發現，在D21 細胞受到亞砷酸鈉處理後，明顯在細胞中較同樣處理的CHO-K1細胞累積較多的砷化物在細胞之中的現象。同時本實驗也觀察到處理過25μM SA 4小時的D21 細胞在不含SA的培養液中一段時間後，此敏感細胞株對砷化物仍有累積較多的情形。此結果顯示：造成D21細胞較CHO-K1 細胞對亞砷酸鈉敏感的原因可能和敏感細胞中砷化物的累積較多有關。在D21 細胞的敏感特性方面，以ＬＤ50而言，本研究也發現D21 細胞對DNA damageagents：ENU、 順－雙氯雙鉑(Cisplatin) 及伽瑪射線 (γ-ray) 只有1.5 至2 倍左右的敏感性。在對重金屬之細胞毒性方面，D21 細胞對五價的 sodium arsenate較CHO-K1細胞高７倍的敏感性且對氯化汞 (HgCl□) 也較CHO-K1細胞高３倍的敏感性。但是對硫酸鋅 (ZnSO□) 及氯化鎘 (CdCl□) 只有1.5 到2 倍的敏感性。因此，砷化物對D21 細胞所造成的毒性機制，可能和直接或間皆造成細胞DNA 的傷害無關。另一方面，從D21 細胞在本實驗中只對亞砷酸鈉及砷酸鈉有七倍左右的敏感性得知，砷化物對D21 細胞所造成的毒性機制可能和其他重金屬不相同。