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後突觸質密區及麩胺酸受器之顯微結構
Thesis

後突觸質密區及麩胺酸受器之顯微結構

王瑛萍
Masters, National Tsing Hua University
1996

Abstract

後突觸質密區麩胺酸受器顯微結構 postsynaptic densityglutamate receptormicrostructure
摘要:中樞神經系統中,兩神經接連點的神經突觸接合區 (synapticjunction;簡稱 SJ) 是由高度特化的前、後突觸膜 (pre- and post-synaptic plasma membranes),及其間將二者連接之結構 (synapticcleft),及後突觸質密區 (postsynaptic density;簡稱 PSD)所組成。PSD 為結構緊密之蛋白質結構,由於其上的蛋白包括了多種蛋白激脢(protein kinases)、細胞骨架蛋白(cytoskelatal protein),以及神傳導物受器及離子通道等等,因此推測PSD對維持神經突觸結合區構造之完整性以及訊號傳遞的調控扮演重要的角色。AFM(atomic force microscope)是個特殊且有利的分析生物樣品 結構的工具,而且在很多狀況下可以得到不導電(non-conductive)樣 品的優良影像。最特殊的是:與一般傳統的電子顯微鏡不同,它可以 同時在純粹液體(fluid)或是潮濕(ambiant)的環境下操作。其優點還包 括:只須少量的樣品,便能從其三度空間的資料得到高度的解像力。 另外麩胺酸受器中之AMPA(□-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionate)次類型受器是負責在快速興奮性神經系統中之訊號傳遞,這些受器在表膜上的四級構造,亦是大家極欲了解的課題。本實驗可以分為三大部份:第一部份是利用TEM(transmissionelectron microscope)觀察負染色的PSD形態組成,再以EGTA/EDTA處理PSD,探討Ca2+與PSD的關聯性。本研究結果顯示Ca2+是維持PSD完整形態的關鍵因素之一。第二大部份是利用AFM觀察PSD的表面外形。第三大部份則是以爪蟾蛙卵(Xenopus laevis oocyte)做為實驗材 料,結合電生理的方法(two electrode voltage clamp)並以免疫抗體金顆粒染色,利用TEM觀測麩胺酸接受器的subunit組成數。

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