Abstract
一般細菌抗氯黴素的機制來自其具有氯黴素乙醯轉移酵素chloramphenicol acety-ltransferase。負責轉譯此氯黴素乙醯轉移酵素的基因密碼,稱為cat 基因。CAT酵素的功能在於將氯黴素接上乙醯輔脢A (acetyl coenzyme A),使氯黴素失去活性,而使細菌抗氯黴素。由於CAT 酵素的分析方法簡便,因此CAT 酵素在現今分子生物研究中經常被用來當作報告酵素(reporter enzyme) 。對一株高度抗輻射細菌Deinococcus radiodurans 而言,由過去的研究已知其對氯黴素非常敏感,並且已經被證實可以表現外來生物體(來自Transposon 9)的cat 基因。最近當我們在使用 insertional inactivation 技術以分離突變株時,我們意外發現在轉形操作中用來當 marker 的cat 基因至少在兩株 D. radiodurans 中存在。支持我們認為D.radiodurans 帶有cat 基因的證據包括:一、以細胞萃出物所作的CAT 分析所得之正反應數據;二、以來自transposon 9的cat 序列當作探針所作雜交試驗可得訊號;三、成功的分離高抗性突變株等三點。D. radiodurans的cat 基因表現與來自E.coli的typeI cat 相同,皆屬於組成性(constitutive expression) ;然而有趣的是,當我們以低劑量氯黴素前處理2小時之後,其對於氯黴素抗性可以提高至兩倍左右。根據目前對有關cat 研究有關文獻的回顧,我們發現所有的cat 基因皆存在於抗藥質體R plasmid 或轉位子 transposable element 上。因此,對於無法適用transposition、transduction、conjugation、protoplast fusion 等分子生物技術的 D. radiodurans 而言,發現D. radiodurans存在cat 基因這個事實,無疑對D. radiodurans 的遺傳研究提供一個不錯的方向。