Abstract
本論文以會引起慢性傳染性呼吸道疾病, 造成患畜生長遲滯、飼料換肉率顯著降低,致使養豬戶遭受很大經濟損失的豬霉漿菌肺炎(mycoplasmal pneumonia of pig)為實驗便, 使用經0.5%formalin去活化的豬肺炎霉漿菌(mycoplasma hyopneumoniae)全菌為微粒包覆之抗原, cellulose acetate phthalate(CaP)為腸溶性包覆殼膜, 採用「溶劑蒸發法」(solvent evaporation process) 將抗原製成腸溶性的微粒膠囊口服疫苗。在疫苗的穩定性測試方面, 本研究以酵素結合免疫吸附試驗(ELISA) 測定M.hyo-pneumoniae抗原在不同溫度、pH值與胰蛋白分解酵素(trypsin) 濃度下的安定性。實驗結果顯示M.hyopneumoniae 疫苗微粒膠囊均較未包覆的原抗原(free antigen)安定;M.hyopneumoniae抗原經微粒包覆處理後, 其劣化活化能從原來之13.6kcal/mol提高到23.6Kcal/mol, 抗強酸(pH1.2, 2 小時) 能力則從原來只殘留34% 抗原活性提高到68%;至於胰蛋白分解酵素對M.hyopneumoniae 抗原性之破壞速率, V(1/min), 則和酵素濃度有關, 且可以類似Michaelis-Menten之速率方程式加以描述。由實驗數據求得疫苗微粒膠囊之參數顯示CAP 微粒膠囊可以增加M.hyopneumoniae 抗原對胰蛋白分解酵素的抵抗性。M.hyopneumoniae 疫苗微粒膠囊在腸液中的抗原釋出行為則可以「溶蝕制放」(bioerodible controlled release)模式加以描述。將血清當做M. hyopneumoniae疫苗徽粒膠囊的添加劑, 此添加劑不影響CAP 的腸溶特性, 且可以修飾微粒膠囊表面, 使微粒膠囊變成表面光滑、流動性好的完美顆粒, 阻止或減緩M. hyopneumoniae抗原受強酸的侵蝕、破壞; 此外, 血清中含有蛋白質分解酵素的良好抑制劑, 可以保護抗原不被胰蛋白分解酵素破壞、分解, 順利地送達集合淋巴結, 誘發免疫反應, 一舉解決強酸及腸內酵素會對M. hyopneumoniae抗原產生破壞作用的問題。最後, 經動物實驗證實, 腸溶性M. hyopneumoniae口服疫苗微粒膠囊之免疫保護效果良好, 證實泛黏膜免疫系統 (common mucosal immune system) 的確存在於豬的消化道與呼吸道之間, 亦即消化道與呼吸道之間的免疫機構是互通的, 而經由腸道免疫也是一種相當值得應用與推廣之免疫方法。