Logo image
愛玉子果皮中一個cDNA的分析
Thesis

愛玉子果皮中一個cDNA的分析

楊豐瑞
Masters, National Tsing Hua University
1994

Abstract

果膠酯酵素,基因庫,探針 pericarp,polygalacturonase(PG),open reading frame
愛玉子(Ficus awkeotsang Makino)是本省主要的森林副產物,其果皮(pericarp)含有豐富的果膠酯酵素( pectin methylesterase;PME),是愛玉子形成果凍的主要成份。在食品工業上,PME可以和polygalacturonase(PG)共同用來澄清蘋果果汁。而且,可以用來生產低能量的食品及提供組織培養上的應用。由於愛玉子果膠酯酵素在食品工業上具有很大的潛力,我們實驗的目的是希望能藉由遺傳工程上的技術,從愛玉子的瘦果分離出果膠酯酵素的基因,加以鑑定並測定其核酸序列。由於目前愛玉子尚無基因庫(library)存在,本實驗室曾以愛玉子的瘦果為材料,製作了一個愛玉子基因庫。並用愛玉子PME抗體為探針(probe),從愛玉子果皮的cDNA基因庫中,分離出一個約1200 bp的cDNA clone,命名為fa1。用Sanger酵素法(enzyme method)做雙股DNA定序。此段 cDNA的鹼基組成(base composition)為24.8% A,19.8% C,23.3% G和32.1% T。這個cDNA含有一段636 bp的 open reading frame(ORF),它所演繹(coding)的蛋白質為211個氨基酸。如果就演繹序列的633個核酸(nucleotides)分析,則其鹼基組成分別為24.6% A,21.3% C,25.0% G,29.1% T。然而fa1 clone和其他的PME cDNAs不具有相似性(homo- logy),fa1和pe1的相似度小於28%,因此可能不是一個PME的基因。經由北方氏法亦證明了fa1cDNA在愛玉子的果皮及葉子中會表現。以PCR反應及南方氏法分析愛玉子的genomic DNA,顯示其中含有fa1的基因。

Metrics

1 Record Views

Details

Logo image