Abstract
本論文旨在研究應用結合單株抗體之磁性顆粒以從骨髓中除去帶有共同性急性淋巴性白血病(CALL,common acute Lymphatic Leukemia )抗原之白血病細胞之程序,並運用抗原─抗體結合動力學之理論解釋所觀察到之現象。從以靶細胞( target cell,Nalm-6) 為對象所做之基礎實驗進而推展至從靶細胞與非靶細胞混合液(Nalm-6,CTVI,BALL),靶細胞與正常骨髓細胞混合液中除去靶細胞之各項實驗。本研究使用表面被覆一層羊抗鼠免疫球蛋白之磁性顆粒與能辨認CALL抗原之單株抗體(CTO4) 於4℃下作用24小時後再與表面帶有CALL抗原之單株抗原之人體白血病細胞株(cell line),Nalm-6混合,則結合至磁性顆粒上之細胞株可經由磁鐵而分離之。經此分離程序可達99%以上之除去效率且經CFU-C實驗證明此種處理對正常骨髓細胞不會造成不良影響。細胞之除去效率決定於溫度,結合至磁性顆粒上之單株抗體量及磁性顆粒對細胞之比例。除決定適當之細胞一顆粒比及其他最佳操作條件外,並發現在37℃下進行較其它較低溫之效果良好;而過量之單株抗體及非靶細胞之存在對除去效率有抑制效應。除此,表面帶有CALL抗原之細胞株,與能辨認此抗原之單株抗體於4℃下作用30分鐘後,再與結合羊抗鼠免疫球蛋白之磁性顆粒混合,亦可得近似之除去效率。此外,運用 I標識之單株抗體與細胞株Nalm-6之結合動力學實驗,發現37℃下,不僅反應速率較,且細胞表面抗原分子之顯現隨溫度之升高而增加。當溫度從4℃升至37℃時,細胞表面抗原分子數目由9.81×102 1╱μ㎡升至1.57×103 1╱2μ㎡,益加證實於本研究系統中,高溫較利於磁性顆粒與細胞之結合反應。