Abstract
本論文第一部份在探討1?10 mM細胞外鈣離子對膠濾型入類血小板引發的反應. 研究的範圍包括了:(一)血小皮的鈣離子擷取與轉運 (各個鈣離子儲庫分佈及變化) ;(二)鈣離子對血小板形態學的影響;(三)鈣離子對血小皮生化反應 (包括: 磷脂代謝, 蛋白質磷酸化) 的影響;(四)鈣離子對血小皮生理反應 (凝集反應) 的影響.首先, 血小板各個鈣離子儲庫的定量, 是以(i) quin 2來評估細胞內自由鈣離子濃度, 和 (ii) 45CaCl2 和 EGTA 共同作用來決定出三個鈣離子儲庫 (EGTA可釋出, EGTA不可釋出和細包膜結合) . 在細胞外鈣離子存在下, 血小皮的 EGTA 可釋出和不可釋出鈣離子儲庫持續性的擷取鈣離子, 以維持細胞內自由鈣離子濃度於很低的水平. 其中 EGTA 可釋出鈣離子儲庫的吸收速率是與細胞外鈣離子濃度不相依賴的, 相反的 EGTA 不可釋出鈣離子庫的捕捉鈣離子為一級動力學的. 以電子顯微鏡照相技術來觀察血小皮之形態變化, 發現血小板的形態可由鐵餅狀, 蝌蚪狀到不規則狀, 甚至溶胞的順序, 逐漸的變化; 而這種漸進的變化與細胞內自由鈣離子濃度緩慢上升有配合性.當司調控細胞要角的 EGTA 不可釋出鈣離子儲庫達到 3,000 pmol/10★cells 的飽和量時, 多餘的鈣離子就多留在 EGTA 可釋出鈣離子儲庫而可看到其量的遽增, 同時發生的形態變化是細胞開始發生溶胞. 所以由此可推論說: EGTA可釋出鈣離子儲庫的最大安全容積為 1,100 pmol/10★cells . 各種血小板的胞器對於此二種鈣離子儲庫的可能供獻在論文中會有討論說明.同樣的細胞外鈣離子存在下, 血小板細胞膜表結合鈣離子儲庫也持續不斷的增加. 當它們吸收容量達到 160和 600 pmol/10★cells 的時候會改它們對鈣離子的結合速率, 而比起始速率分別增加了 7和11倍. 也就是說血小板細胞膜的構造被改變而曝露出更多的結合部位. 另外當細胞膜表結合鈣離子儲庫的存量達剽 600 pmol/10★cells的時候, 可發現血小板細胞膜表面會有囊胞形成. 雖不知其構造, 但是知道它們的形成是鈣離子專一性的, 而且會對血小板的許多功能造成抑制.另外研究中看到其他鹼土族二價陽離子對血小板有不同的影響, 其中鍶離子在無刺激劑存在下對血小板有輕度的活化作用. 二價陽離子的捕捉劑中: EDTA對血小板有刺激變形的作用; EGTA則對鈣離子作用的血小板有促進溶胞的作用.本論文第二部份為在挪威一年的研究工作, 主要探討豬血小板的磷脂酸: 細胞□轉移□的性質及它在血小板的定位. 實驗發現豬血小板的細胞□轉移□是存在的, 它可摧化 3H-CTP 和PA之間的作用而轉變成 3H-CDPDG . 在 HEPES緩衝液中, 該酵素的合適酸鹼值為 8.0; 對鎂離子和 Triton X-100 最合適需求濃度分別為 5 mM 和 1% . 實驗也決定出了細胞□轉移□的活性絕大部份 (95%)是分佈在富粒線體的細胞分部.