Abstract
木腐黴Trichoderma koningii G-39 受到纖維素或寡醣等碳源的誘導會大 量製造纖維素水解酵素, 其中纖維素外雙醣水解酵素(CBHI)可佔胞外蛋白 質總量60%以上, 由該酵素基因的序列發現, 在其5'端上游有五個5'-(G/ C)PyGGGG-3'特定序列與其他真菌所發現的碳源代謝抑制子 (如 Saccharomyces cerevisiae 的MIGI及Aspergillus nidulans 的 CREA) 結合部位的特定序列相同。為探討此纖維素外雙醣水解酵素I基因上游5 個特定序列是否也與碳源代謝抑制作用有關, 本研究將木腐黴T. koningii G-39 分別培養於不同的碳源(glucose、xylan、sophorose 及 oligosaccharide)中, 並以含該基因上游特定序列的核酸片斷為探針進行 一系列實驗, Gel mobility shift assay 結果發現當真菌培養於含葡萄 糖的培養基時, 此些探針上會有專一性蛋白質的結合。RT-PCR 及 Western blooting 的結果也顯示在同一條件下纖維素外雙醣水解酵素I 的mRNA 及 蛋白質的合成完全被抑制。 相反地, 將原本培養於含葡萄糖 培養基的真菌轉換到含有 sophorose、oligosaccharide、xylan 的培養 基時, 此些探針與蛋白質結合的現象會隨著培養時間增長而消失, 而此酵 素基因的mRNA 及蛋白質的表現也可明顯地被偵測到。本研究據此推測纖 維素外雙醣水解酵素I 基因的表現受葡萄糖代謝抑制用(Glucose repression) 的調控乃由於有碳源代謝抑制子在葡萄糖存下會結合到基因 上游特定序列及周遭區域, 以抑制該基因的表現。