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木腐黴中鳥糞票呤核甘二磷酸解離抑制因子的核酸定序與分析
Thesis

木腐黴中鳥糞票呤核甘二磷酸解離抑制因子的核酸定序與分析

蔡苓莉
Masters, 國立清華大學, 生命科學系
1993

Abstract

鳥糞票呤核甘二磷酸解離抑制因子 互補基因庫 木聚醣酵素 溶菌斑雜合法 GDI cDNA library endoxylanase plaque hybridization
分離自臺灣本土的木腐黴 (Trichogerma koningii G-39) 為一種絲狀真 菌. 在實驗室的培養下,可藉由培養基中碳源種類的調整誘導該菌分泌出 許多不同的纖維素水解酵素 (carbohydrocellulase) 及木聚醣酵素 (endoxylanase) . 在本實驗室早先的研究中以溶菌斑雜合法 (plaque hybridization) 選殖到木聚醣水解酵素基因的一個 355 bp的片段. 經由 染色體步移 (chromosome walking) 的策略選殖到一段長 4 kb 的 EcoRI 片段. 再經由核酸定序分析與基因庫資料比對得知此片段前端約 1.4 kb 長的區域與人類 rab 族之鳥糞票呤核甘二磷酸解離抑制因子的核 酸序列有頗高的相似性. 這引起了本實驗室的興趣,希望能藉此選殖到木 腐黴鳥糞票呤核甘二磷酸解離抑制因子的基因;因為木腐黴的這個基因尚 未被報導。經由染色體步移繼續進行選殖到長 1.4 kb 長之 HindIII 片 段.此一片段同樣地被分析其序列並與其他生物的鳥糞票呤核甘二磷酸解 離抑制因子的核酸序列做比對. 結果發現 : 一 . 木腐黴此一基因總長約 為 2 kb. 二. 此基因內有七個插入序列 (introns) 與九個表現序列 (exons). 三. 木腐黴在此基因與他種生物的相似程度為 50%- 52%. 上述 在不同實驗中選殖的鳥糞票呤核甘二磷酸解離抑制因子各基因片段已被完 整地接合建構在質體 pBluescript KS(+) 上. 此一建構質體經證實可以 在大腸桿菌中複製,相信日後可以被利用來做此基因的相關研究。

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