Abstract
本論文採用二種不同的方法來分離和果蠅嗅覺相關的基因。第一種方法稱為差異性篩選法，這個方法可用來篩選只在果蠅觸角內表現，而不在頭部其他部份表現的基因的互補 DNA選殖體。四個可能的觸角專一性選殖體被分離出來，並進一步用北方混交法和核酸定序分析加以鑑定。結果顯示其中至少有二個是所謂觸角優勢性的 (非專一性) ，亦即在其他組織也有表現但在觸角內表現較多。這兩個選殖體之一，A3，其核酸序列經決定後，發現其可載錄一個長 189胺基酸的多 鏈。我們利用電腦程式將之與所有基因資料庫中已知的基因對比，結果未發現有任何和A3相似者，因此A3極有可能個有趣而重要的基因。第二種方法是篩選果蠅觸角的G 蛋白耦合受器。許多生化和電生理的研究結果得知，不論是哺乳類或昆蟲的嗅覺系號傳遞都可能是藉由 G蛋白放大反應而進行。這一點和視覺及許多種神經傳遞物質訊息傳遞的方式雷同，而後二者均是透過 G蛋白耦合受器來作用，因此嗅覺受器也很有可能即是同類但不相同的分子。目前所有已知的 G蛋白耦合受器基因都有部份序列非常相似，而許多新的 G蛋白耦合受器就是利用這些序列相似性被分離出來。所以我們利用老鼠的二個 G蛋白耦受器 (M2和M5葷毒鹼型乙醯膽鹼接受器muscarinic acetylcholine receptor,mAChR)互補DNA 選殖體為探針來篩選果蠅觸角的 G蛋白耦合受器。互補 DNA選殖體Agr2就是利用這二個 G蛋白耦合受器探針分離出來的，經過分析已證實它是個觸角 (或頭) 專一性表現的基因。雖然我們仍未能確定它是否真是個 G蛋白耦合受器基因，但是至少已知能和老鼠mAChR 探針強烈的混交在一起，由此顯示他們彼此間一定有相當程度的序列相似性，Agr2的部份核酸序列決定後得知其也能載錄一頗長的開放閱讀巨構(oper reading frame)。同樣將之與基因資料庫比對後，也未發現有任何已知的基因和Agr2相同。