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水稻種子發芽基因篩選之轉譯延長因子--1 alpha 基因
Thesis

水稻種子發芽基因篩選之轉譯延長因子--1 alpha 基因

王俊峰
Masters, National Tsing Hua University
1996

Abstract

轉譯延長因子-1 alphamRNA 差異性展示法反轉錄聚合酵素連鎖反應北方雜交試驗 tanslation elongation factor-1 alphamRNA differential displayreverse transcription polymerase chain reactionNorthern blotting
本論文以水稻為材料,探討水稻在生長發育中基因的表現情形,為了要得到更多水稻生長發育有關的訊息,我們利用 mRNA differential display 的方法,篩選在種子發芽過程中表現不同的基因,並且定序分析. 分析了十七組基因片段之後,其中 ad2s61-2 與 ad2s62-2 的DNA 序列與小麥的elongation factor-1 alpha (EF-1 alpha)基因具有70.4%與68.7%的相似性.為了得到水稻 EF-1 alpha 的序列全長,從發芽四天的胚鞘中,利用反轉錄聚合酵素連 鎖反應 (RT-PCR)的方法,得到 EFAC1-1的 cDNA片段.聯合 EFAC1-1 及 ad2s62-2的序列,即是水稻中轉譯延長因子-1 alpha 的cDNA 序列,命名為REF-1 alpha (Rice ElongationFactor-1 alpha).在北方雜交試驗結果指出, REF-1 alpha 在種子發芽第三,四天胚鞘的表現量比較高,以及在成熟稻米植株中,鞘,莖的表現亦高.但在 ABA(abscisicacid),冷害,缺糖處理的情形下會抑制其表現.我們的實驗結果說明在種子發芽過程中可以用 mRNA dif-ferential display 的方法選殖基因,並利用北方雜交試驗結果得知基因的表現.

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