Abstract
中國倉鼠卵巢細胞(CHO-K1)長期生第在漸次增加順一雙氨雙氯鉑化物(Cisplatin) 濃度的培養液中可獲得Pt-r6 和Pt-r8 兩株抗性細胞，其中Pt-r6 可生長在含6μM ci-splatin 的培養液，而Pt-r8 則可以生長在8μM cisplatin的環境中。由cisplatin處理2 小時後的群落形成分析結果顯示Pt-r6 和CHO-K1細胞的50% 致死劑量分別是163 和7μm。雖然Pt-r6 細胞內的膠氨基硫(Glutathione;GSH) 含量是CHO-K1細胞的 2倍(P＜0.05) ，但增加或減少CHO-K1和SPSt-r6 細胞的GSH 含量後，並不影響cispa-tin 對細胞的毒性。而細胞膜上P-Glycoprotein的含量，在CHO-K1和Pt-r6 細胞中沒有差異。由電漿偶合原子激發光譜(ICP-AES) 來測定cisplatin 在細胞內的累積量，發現Pt-r細胞比CHO-K1細胞的累積少4-5 倍(P＜0.05) 。將可以識別 cisplatin-DNAadduct 的單株抗體(MoAb 62-5) 應用在酵素連結免疫分析(ELISA) 以及細胞流動分析(flow cytometry;FCM)，可以區別出。 Pt-r 細胞產生的adducts 較CHO-K1細胞少(P＜0.05) 而且cisplatin-DNA adduct的形成，在 Pt-r 和CHO-K1兩種細胞中均與c-isplatin處理的劑量和濃度成正比。CHO-K1細胞處理 0,10, 15 和25μM (cisplatin) 2 小時後所產生的低量adduct (造成存活率大於 2%)的相對平均螢光值(RMFI)，可以利用細胞流動分析儀(FCM) 方法區分出來，將此相對平均螢光值與相對平均螢光值與相對應的細胞死亡程度作分析，發現有良好的正相關(r=0.91)。而將來自 FCM的adduct平均螢光值和來自 ELISA的 adduct O.D.值 (處理 cisplatin 0?100μM,2小時)作相關或者將來自 ICP-AES的 cisplatin累積量和來自ELISA 的Adduct O.D. 值作相關( 處理cisplatin 0?400μM,2 小時) ，均有很好的正相關 ( 分別是r=0.96 r=0.91)。以上結果表示： Pt-r 細胞對低劑量cisplatin 有抗性的機轉可能與其累積之cisplatin 含量較少和cisplatin-DNA adduct的形成少有關，而且關於細胞對藥物的累積能力與 cisplatin-DNAadduct形成的量和細胞死亡率有彼此相關的趨勢。