Abstract
流行性感冒(Influenza)是全球普遍的感染性疾病，每年導致高或低的發病率及致死率，甚至對全球經濟造成衝擊。早期研究指出流感病毒血球凝集素hemagglutinin (HA)被視為調控流行性感冒病毒毒性、致病性的重要標的物；受到流感病毒感染後會刺激促發炎(pro-inflammatory)因子的生成，並進一步活化樹突狀細胞(dendritic cells)和引發後天性(adaptive) 的免疫反應。然而，目前對於血球凝集素如何參與調控流行性感冒及其對免疫反應的影響機制仍不清楚。此篇研究主要是利用桿狀病毒昆蟲表現系統(baculovirus/insect cell expression system)分別產生mouse-adapted H1(WSN)、2009年爆發的豬起源(swine-origin)流行性感冒 H1 (Texas)和禽流感H5(KAN-1)的重組血球凝集素蛋白，並用 Ni-NTA resins將其有效地純化出來並用西方墨點法確認HA特性。接著將這些重組蛋白加入老鼠骨髓來源的樹突狀細胞(bone marrow-derived dendritic cells(BMDCs))中，並利用流式細胞儀(FACS)和酵素結合免疫吸附分析(ELISA)偵測細胞激素TNF-□□和IL-12□p□□的產量。結果顯示此三種不同品系(strains)的流感病毒蛋白HA皆可以促進TNF-□和IL-12p70的生成，活化DCs，但三者之間並無顯著的差異性。另外，利用proteinase K，進一步證明DCs的活化是由於HA蛋白的刺激所致。除此，藉由DCs表面上輔助刺激分子(co-stimulatory molecule) CD40和CD86表現量的提升及其內嗜作用能力(endocytosis capability)降低的結果，可知當DCs被流感病毒HA蛋白刺激後，會活化且進一步成熟，由以上結果推判DCs可完整呈現抗原並進一步活化TH1細胞分化和/或刺激胞殺性T淋巴球(CTL)後天性免疫反應。另外，利用TLR4 mutant和MyD88-/-基因剔除鼠(knock-out mice)進一步證明DCs的活化途徑和TLR4¬-MyD88路徑相關。藉由上述結果可讓我們對於DCs在受流行性感冒病毒感染時，其所參與調控HA的機制更為了解，這些資訊可提供重要的參考依據，對日後高致病性(pathogenicity)或高傳染性(transmission)流行性感冒的疫苗設計或是專一性的藥物標靶治療將有所助益。