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清大原子爐產□□P之高活性r-□□P-ATP 製造及其生化學利用
Thesis

清大原子爐產□□P之高活性r-□□P-ATP 製造及其生化學利用

李雲先
Masters, National Tsing Hua University
1985

Abstract

清大原子爐高活性r-32P-ATP生化學利用酵素濃縮處理熱處理副產物大腸桿菌 POLYPHOSPHATEE.COLI
利用酵素製備高活性r–32P–ATP 之方法已被發展出。我們利用商業化的酵素系統和清華大學原子科學研究所同位素組所生產的32Pi製備高活性的r–32P–ATP 。如果直接自約1毫升之2mCi之32Pi溶液取25ul進行反應,則產率可達96.5%。如果使2mCi 的32Pi溶液在55℃下經熱濃縮至25ul再進行反應,則產率降至91%。上述兩實驗結果之差異,可能在於後者經濃縮處理後含較高量的熱處理副產物–polyphosphate 所致。若考慮ADP(sigma)中小於0.5mole%ATP之不純含量,則我們所製備的r–32P–ATP的比活性約為5,600Ci/mmole。我們利用製備出的r–32P–ATP,監測E.Coli(大腸桿菌)和C.tetani (破傷風桿菌)之核糖體系統在試管中關於ppGpp&pppGpp 之合成。經證實C.tetani HarvardA47和E.Coli strains,B,K12(λ),相似,亦能合成ppGpp&pppGpp 之類似物。

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