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澱粉枝切酵素isoamylase生產菌Pseudomonas amylodernmosa 基因選殖系統的建立
Thesis

澱粉枝切酵素isoamylase生產菌Pseudomonas amylodernmosa 基因選殖系統的建立

陳椒華
Masters, National Tsing Hua University
1984

Abstract

澱粉酵素ISOAMYLASE選殖系統篩選抗性程度洋菜膠電泳分析 PSEUDOMONAS-AMYLODERNMOSANITROSOGUANIDINE
我們利用澱粉枝切酵素isoamylase於洋菜培養基上分解amylopectin ,而在菌落周圍形成混濁環之現象,建立了一種篩選isoamylase生產力突變株之簡易方法,採用此法,分離出六株isoamylase低產突變株,由其菌體內外之酵素活性皆低於野生菌株,顯示出變異株在酵素合成機制上有所缺損。這些突變株並無法被質體pKT230所轉形,將野生株及四株低產突變株再以Nitrosoguanidine處理後,分離出八株能夠被pKT230轉形之突變株,由菌體對抗生素的抗性程度及洋菜膠電泳分析,可證實轉形菌株內pKT230之存在。於非選擇性培養基中,轉形菌株雖無法穩定地維持pKT230,但其轉形效率皆高於104 transformants/ug DNA,且菌株isoamylase之生產似乎並未受質體轉形之影響,此結果顯示本選殖系統(pKT230/ 低產轉形突變株)適用於Pseudomonas amyloderamosa isoamylase基因之選殖。

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