Abstract
在本論文中，主要是探討熱壓力回應對細胞中激脢 FA/GSK-3α的影響，並進一步了解其可能之調節機制。細胞經過熱處理之後， 利用免疫沉澱法、免疫轉印法以及磷酸氨基酸分析等方法， 結果發現熱壓力回應造成激脢 FA/GSK-3α 的活性和蛋白質量的增加。 若細胞先經一核醣核酸轉錄抑制劑─放線菌素 (Actinomycin D) 的前處理，則熱壓力回應造成激脢 FA/GSK-3α 的蛋白質量增加會被抑制住；而其活性會為酪銨酸激脢抑制劑 (genistein) 或蛋白酪銨酸去磷酸激脢(protein tyrosinephosphatase)所抑制。 由此可證實熱壓力回應造成激脢 FA/GSK-3a 活性的改變， 除了進行蛋白質合成外，仍需經由轉譯後修飾─即酪銨酸的磷酸化，才能使其活性增加。 另外，在相同熱處理條件下 ， 與分子量70kDa 之熱休克蛋白質 (heat shock proteins) 比較，發現激脢 FA/GSK-3α可能是熱誘發過程中較早被引發之蛋白質。為了進一步了解激脢FA/GSK-3α合成之調節機制，所以利用激脢C 的調節因子─phorbolester(TPA) 和 sphingosine，以及蛋白去磷酸激脢抑制劑 (okadaicacid) 來探討是否此調節機制須透過磷酸化來控制。結果發現細胞先經過斯u時間 TPA 或 okadaic acid 的前處理後再給予熱處理，會抑制其蛋白質之合成；若是給予 sphingosine 或長時間 TPA 處理，則反而有加強的作用。 由此可知，對 TPA / sphingosine 敏感之 PKC 異構物以及對okadaic acid 敏感之絲氨酸/蘇氨酸去磷酸激脢 1 和 2A(ser /thrphosphatases 1 and 2A) 在激脢 FA/GSK-3α 被熱誘發之過程中扮演調節的角色。