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生物螢光技術應用於醱酵醪中ATP 含量的測定
Thesis

生物螢光技術應用於醱酵醪中ATP 含量的測定

姚學華
Masters, National Tsing Hua University
1986

Abstract

生物螢光技術醱酵醪土黴素抗生素 BFTANTIBIOTICSATPLUCIFERIN-LUCIFERASE
本研究在於建立以luciferin-luciferase 反應測定醱酵醪中菌絲ATP 含量的方法,並藉以探討ATP 是否和抗生素生合成之調控有關。醱酵醪必須先經過適當的稀釋以減低光學性與化學淬熄效應。稀釋後的醱酵醪以核 酸釋出溶劑處理10秒,隨後立刻加入luciferin-luciferase 混合物,後者與ATP 作用所發散出的光子再以螢光計數器偵測。利用修正步驟測定接受相同處理,不同三角瓶醱酵的土黴素生產菌Streptomyces ri-mosus 菌絲ATP 含量,結果顯示,所用方法精密度良好;離散係數低於15%。將5種不同土黴素生產能力(由900至6,500ug╱ml醱酵醪)的S. rimosus菌株醱酵10天,並在不同時間取樣分析,結果顯示,菌絲ATP 含量(以mg╱g 蛋白質表示)沒有顯著差異。另外,在醱酵培養基中添加無機磷酸鹽(KH2PO4、2g╱l)雖然會明顯地抑制土黴素的生合成,但菌絲ATP 含量仍無顯著改變。這些結果暗示,ATP 不是調控S. rimosus生合成土黴素的作用因子。

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