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發展一個分離中樞神經細胞軸突的細胞培養裝置
Thesis

發展一個分離中樞神經細胞軸突的細胞培養裝置

黃琮凱
Masters, 國立清華大學, 分子醫學研究所
2012

Abstract

神經 軸突 裝置 聚碳酸酯膜 軸突收集平台
神經元(neuron)是一種高度特化的細胞,具有許多特化性次細胞結構。其中軸突(axon)是一種細長的神經纖維(process),從神經細胞本體(soma)中延伸出去接上目標細胞,在神經系統的功能和發育上軸突都扮演相當重要的角色。然而目前對中樞神經系統(central nervous system)軸突的研究並沒有很好的體外培養(in vitro)研究平台。因此本論文發展一個裝置,此裝置可以將大鼠(SD rats)海馬迴神經細胞(hippocampal cells)的軸突和細胞本體以及樹突(dendrites)分離開來,裝置使用孔徑為1μm的PCTE(聚碳酸酯)膜,並在PCTE膜下方緊貼著有孔洞且厚度為500μm的PDMS膜,之後上下由兩個大小相同的PDMS夾板固定組成。將海馬迴神經細胞養在PCTE膜上,因細胞本體的直徑約為10μm,所以會被侷限在PCTE膜上,僅有神經纖維可以穿過PCTE膜的孔洞往PDMS膜生長;成熟的神經細胞其樹突的長度只能長到約300μm,然而軸突的長度可以長到超過500μm,所以利用此裝置能夠在PDMS膜下層部分收集到單純的軸突。利用免疫螢光染色法證實在此裝置的PDMS膜下層僅有軸突而沒有樹突或是細胞本體存在。

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