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發展一個研究神經網路發育與功能之方法學
Thesis

發展一個研究神經網路發育與功能之方法學

張世裕
Masters, 國立清華大學, 分子醫學研究所
2010

Abstract

神經網路 PDMS 海馬迴 光學微影術
於過往神經細胞的體外培養,通常是需要事先被覆適合的分子在培養基板上,以幫助神經細胞貼附生長。因此,利用微壓印技術先在培養基板轉印出特定分子圖案,再投入神經細胞,就能夠侷限神經細胞只貼附在培養基板的特定分子圖案區域,之後神經突起生長也必須遵循此圖案形式。然而,這樣的方法不能避免大面積的神經聚集團出現在圖案上,破壞生長形式的規則與完整性。因此,在本實驗中,我們發展一個方法學,試圖去控制細胞本體只座落在圖案的特定位置上,進而生長成神經網路,並且使大面積神經聚集團的出現機率降低。 利用光學顯影技術製作一系列不同規格大小的微米等級的模仁,再由這些模仁翻製出我們所需的PDMS模板。此模板頂部具有64個圓孔,以8 × 8陣列形式排列,底部則為8 × 8方形網狀溝槽,上下相通,將PDMS模板貼附到玻片,加入poly-L-lysine (PLL)使其流入孔洞而在玻片上建立方形網狀圖案。投入細胞後,透過PDMS模板侷限神經細胞只能掉落在特定的位置上,並沿著PLL圖案生長形成神經網路。藉由此方法學的建立,我們將能夠利用活體影像觀察、免疫螢光染色以及電生理紀錄去研究神經網路的發展,最終可以與微電極陣列結合應用,進而去了解神經網路對於各種形式的訊號輸入所產生的反應。

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