Abstract
本論文建立了兩種台灣眼鏡蛇毒蛋白的酵素免疫分析方法（ＥＩＡ），此兩種方法皆以瓊脂粒當固體支持物，標示酵素亦同為horseradish peroxidase（ＨＲＰ），心臟毒蛋白－ＩＩＩ（ＣＴＸ－ＩＩＩ）用競爭方法的可測範圍為１０－２５０ ｇ而三明治方法為０．５－２．５ ｇ。專一性的純化了抗ＣＴＸ－ＩＩＩ的免疫球蛋白，分別會和其他三種ＣＴＸ產生交叉反應，由ＥＩＡ的結果得到如下的可測範圍，用競爭方法ＣＴＸ－Ｉ，－ＩＩ－ＩＩＩ，分別為６０－１，０００ ｇ，３０－５００ ｇ，１５－２５０ ｇ，而用三明治方法ＣＴＸ－Ｉ，－ＩＩ，－ＩＶ，皆相同為１－４ ｇ。我們嘗試結合高效率液體層析儀（ＨＰＬＣ）和ＥＩＡ，gel filtration管柱和揮發性的溶液用在這系統上，而以ＥＩＡ的競爭方法來定ＣＴＸ的量，經由此種結合方式，對於純化後的ＣＴＸ－ＩＩＩ回收率為１００％而粗製的蛇毒蛋白只有４０％，這可能由於粗製蛋白中某些成份影響了分析結果，對於利用離子交換樹脂及ＥＩＡ的三明治方法之可行性亦被討論到。利用polystyrene 片當做固體支持物ＣＴＸ之ＥＩＡ並不是很成功，雖然它的可測極限是此三明治方法的低，但它的再現性不高，這可能由於polystyrene 片的品質不一致或者是ＣＴＸ本身的高負電性（ｐ︿Ｉ＝１０．６）及它可使生物細胞膜活化的性質所致。