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研究人纇腺相關病毒在卵巢 細胞株中的抑 活性
Thesis

研究人纇腺相關病毒在卵巢 細胞株中的抑 活性

黃小萍
Masters, National Tsing Hua University
1989

Abstract

人纇腺相關病毒卵巢 細胞株抑 活性單股直線型 AAVDNARNA
人類腺相關病毒(AAV) ,具有單股直線型DNA ,是小病毒的一種,其抑制癌細胞的功能已被證明,但抑癌機轉則尚不清楚。而且AAV 感染后不具致病性,因此可用來當作控制癌症生長及研究人類細胞轉形癌化的機制。AAV 基因全長4.7kb ,被植入一個質體載體pSV2-Neo中得到了pAVNeo-1這個質體, 然后轉染到卵巢癌細胞株(0C-3L) 中。經過G418篩選得到4 個細胞分株,分別命名為AVNeo-0C#1,#2,#3, 及#4。這些細胞再與原來的母細胞株互相比較,我們使用了4 種標準去比較以評估細胞的轉形特性是否改變,依次是細胞形態,生長速率,血清需求性,及在凝脈中形成細胞群落的能力。結果顯示,植入AAV 的細胞形態比較規則,具有較高的血清需求,較慢的生長速率,并且失去了在凝脈中形成細胞群落的能力。在鑒定主些細胞的特性時,我們抽取細胞的DNA, 測出每個細胞中含有1-3 個AAV 分子。而使用Southern blot 分析則顯示這些AVV 嵌入了大分子量的細胞DNA 中。而使用腺病毒感染試圖釋放出AVV ,卻發現嵌入型式的AVV 無法被釋放出來。RNA 也被抽取來分析人類腫疣病毒16型(HPV-16)及致癌基因的DNA 表現是否被AAV 所影響。結果顯示,HPV-16基因在0C-3L 細胞的表現高於正常組織,而在含有AAV 的細胞則恢復正常的表現。

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