Abstract
自豬腦中純化出來的後突觸質密區(postsynaptic density，簡稱PSD)結構非常緊密，使得研究PSD內部的結構組成相當不容易。本實驗室在之前研究(Cheng, 2009)中表示，當神經細胞經由cold treatments時，會發現α、β-tubulins從dendritic spines中移出(exit)，而幾個PSD中的主要蛋白質: CaMKIIα、cDHC、MAP2，也會從dendritic spines中移出(exit)，這些變化影響著dendritic spines在型態上的改變，並暗示著這些蛋白質彼此之間可能具有交互作用；另外，在彭聖智的論文中也顯示，α-tubulin與CaMKIIα可能會跟其他蛋白質形成次級蛋白質複合體。在本篇論文裡，我們改良過去的方法，利用urea及thiourea將PSD結構打散，再利用免疫吸附法，確定α-tubulin或CaMKIIα所形成的次級蛋白質複合體是相似的，且不同於其他次級蛋白質複合體；並進一步的利用化學交聯劑DTSP，配合免疫吸附及對角線電泳的分析，我們發現在PSD中，可能與α-tubulin存在著直接交互作用的蛋白質有: β-tubulin、actin、CaMKIIα；可能與CaMKIIα直接交互作用的蛋白質為: CaMKIIβ、α-tubulin、β-tubulin。Actin不與CaMKIIα直接作用。另外，在cytosol裡，發現大部分的β-tubulin存在其中，並且與α-tubulin形成hetero-dimer，也可與其他蛋白質形成不同的聚合體；而CaMKIIα在cytosol的含量稀少，但可與α-tubulin形成聚合體，並且在PSD中也可發現相似的聚合體。於是，我們推測，大量存在於PSD的CaMKIIα，部分與α-tubulin形成交互作用，且可能干擾microtubule的形成。這些不同的蛋白質聚合體，意涵著不同的意義及功能，是如何牽涉到 protein trafficking並影響著dendritic spines的dynamic，將是未來需要進一步研究的課題。