Abstract
中樞神經系統的神經突觸接合區(synaptic junction, SJ) 包含了前突觸膜 (presynaptic membrane) ，後突觸膜(postsynaptic membrane) ，後突觸緻密體 (postsynaptic density) ，與兩末梢間的區域。生化分析結果指出，SJ中含有細胞骨架蛋白，神經傳導物質受器，蛋白激□，磷酸化蛋白質和醣蛋白等。有些間接的實驗證據指出，SJ可能直接或間接的調節神經衝動的傳導，但至目前為止，SJ的蛋白質組成和功能仍不十分清楚，因此為進一步了解神經突觸接合區未知的組成蛋白種類及已知組成蛋白之功能，將實驗分為兩部份進行。第一部份利用蛋白質之等電點與分子量大小的不同，以二維電泳分離SJ之蛋白質並純化其中之84kDa 蛋白質。利用trypsin 將84kDa 蛋白質截切成片段，進而做胺基酸序列分析。所得的胺基酸序列和SWISSPROT 資料庫中的蛋白質序列相比對後，部份peptides序列和已知蛋白質序列並無相似性，另有一部份peptides序列則與多種已知的蛋白質序列有些微之相似性。由目前所獲得的片段胺基酸序列並不能對84kDa 蛋白質的種類或功能做任何的定論。以peptides序列合成對應之核□酸為探針(probe) 可於豬腦反訊息DNA集合庫(cDNA library)中尋找帶有84kDa 蛋白質遺傳訊息之cDNA，以期對84kDa 蛋白質做進一步的了解。此外，麩胺酸受器是位於神經突觸接合區上已知參與神經訊號傳遞之蛋白質。為了解魚腦內是否存在AMPA-subtype glutamate receptor ，第二部份實驗則以一段攜帶AMPA-subtype glutamate receptor 之 transmembrane(TM) region 遺傳訊息的DNA 片段，於魚腦cDNA library中篩選cDNA獲得一株純化之cDNA，經DNA 定序分析比對後可歸為rat GluR4 一類，命名為pC8 。分析此cDNA之序列發現其中並無起始譯碼，停止譯碼或poly(A) 尾部存在，所以並不是一個包含完整開放譯讀區之cDNA，此段cDNA和老鼠之GluR1?GluR4之序列比對後，可知此cDNA包含了TM region 前N-terminal的400個胺基酸，三段TM domains (TMI, TMII和TMIII)，及TMIII 和TMIV間的85個胺基酸的譯碼(codon) 。雖然目前此株cDNA並不完整，但可為尋找完整cDNA之有利工具。