Abstract
以往大部分有關於第一型愛滋病毒(HIV-1 )核酸銜接酵素(Integrase)的核酸銜接作用(Integration )之研究,都是利用純化的病毒核酸銜接酵素,加上人工模仿合成第一型愛滋病毒 LTR 兩外端短序列之受質,然後在細胞活體外(in vitro )實驗所得的結果,尚未有得自於細胞活體內(in vivo )的詳細資料。本實驗是將鼠類白血病毒(MoMLV )基因組 LTR 最外面的 U3 之 8 個核酸序列,以及 LTR 最外面的 U5 之 9 個核酸序列,利用基因重組方式,突變成與第一型愛滋病毒的 LTR 序列相同,並且將其鼠類白血病毒的核酸銜接酵素基因切除,然後即可與載有第一型愛滋病毒核酸銜接酵素基因的真核表現載體,一同轉送入 NIH /3T3 細胞株內,以求建立一套分析細胞活體內的核酸銜接作用系統藉以觀察此缺陷的鼠類白血病毒病毒基因組,是否能夠在只有第一型愛滋病毒核酸銜接酵素的存在,不需要其它蛋白質幫助,就能發生如同細胞活體外的核酸銜接作用等功能。另外我們利用免疫螢光染色的方法,也發現在已被轉送入第一型愛滋病毒核酸銜接酵素基因的真核表現載體之 NIH/3T3 細胞核內,初步偵測到第一型愛滋病毒核酸銜接酵素的存在。如果此一活體內之核酸銜接系統可以被建立,將來對於臨床上利用反轉錄病毒為載體的基因治療,或許可以產生更安全的基因傳送方式,另外在尋找抑制核酸銜接酵素的抑制藥物方面,或許可以有效地篩選出來,以對抗愛滋病毒。