Abstract
利用激脢 FA (kinase FA)/肝醣合成脢激脢-3□(glycogen synthase kinase-3□，簡稱 GSK-3□) 的抗體作免疫沉澱，然後測其自動磷酸化 (autophosphorylation) 及激脢的活性，同時配合磷-32 放射性標定與磷 酸胺基酸分析 (phosphoamino acid analysis) 的技術，發現人類表皮上 皮瘤 A431 細胞 (human epidermoid carcinoma A431 cells) 在長時間 暴露於 1 □M 的 TPA (12-O-tetradecanoylphorbol 13-acetate) 後， 使得激脢 FA/GSK-3□上絲胺酸 (serine) 及胳胺酸 (tyrosine) 的磷酸 化增加，同時伴隨活性的增強。另外，若以 TPA直接對純化出來的激脢 FA/GSK-3□作用，則它的活性並不會受到明顯的影響，表示 TPA 是間接 對激脢 FA/GSK-3□作用，並進而影響它的活性。由西方點墨法 (Western blotting) 的實驗証明，激脢 FA/GSK-3□的量在 TPA 處理的 這段時間內並沒有明顯變化，因此它活性的增加因該是由於上述磷酸化增 加所導致的。同時我們也發現，激脢 FA/GSK-3□的活性和其上胳胺酸的 磷酸化程度呈一致的趨勢，而與絲胺酸磷酸化較無明顯的關係。由於在長 時間的 TPA 培養下，可以導致細胞內蛋白質激脢 C (protein kinase C) 的活性下降 95% 以上，因此由 TPA 所調節的激脢 FA/GSK-3□的絲胺 酸及胳胺酸的磷酸化和伴隨的活性增加是與 PKC 無關的。由這些資料顯 示，激脢 FA/GSK-3鈰捋P在一個由 TPA 所調節而和 PKC 無關的訊號傳 遞/胳胺酸磷酸化的過程。