Abstract
本論文旨在研究臺灣眼鏡蛇毒蛋白 (Cobrotoxin) 的免疫化學性質. 臺 灣眼鏡蛇毒蛋白 (Cobrotoxin) 經純化後以電灑離子化質譜儀分析其分子 量為 6948 道耳吞, 以鞍基酸成份分析其鞍基酸組成與以前結果相符, 此 純化毒蛋白即用於免疫 Balb/c 小白鼠. 取出脾臟細胞與骨隨癌細胞融 合經培養後以酵素免疫分析法篩選, 陽性反應者以限數稀釋法單株化, 最 後得到四株穩定的融合瘤: 1G4, 2G6, 3A2, 3B7 等. 亞型定性分析顯示 它們分別是 IgG2a, IgG1, IgG1, IgG2a. 由西方點墨法, 免疫沉澱法, 及競爭性酵素免疫分析法顯示這四種單株抗體辨認空間型的抗元決定基. 另外來自 Cobrotoxin 的五段合成蛋白 CBT (4-12), CBT (18-23), CBT (29-36), CBT (45-53), CBT (56-62) 用於免疫兔子以產生抗合成蛋白抗 體. 純化後的抗合成蛋白抗體均可辨認 BSA-合成蛋白鍵合物, 然而西 方點墨法及免疫沉澱法顯示只有抗 CBT (4-12) 及抗 CBT (56-62) 抗體 會辨認原態及還原態 Cobrotoxin. 競爭性酵素免疫分析法亦有相同結 果. 這顯示 CBT (4-12) 及 CBT (56-62) 含有 CBT 的兩個線型抗元決 定基. 這個結果也有助於尋找可辨識這兩個線型抗元決定基的單株抗 體. 未來由定點突變得到的重組蛋白或其它短鏈的鍵後神經毒素可用於 對這些抗體作更精確的定性.