Abstract
具有組合能力的中間型絲蛋白 vimentin 是純化自牛眼的水晶體，純化的 四聚合體 vimentin 可以組合成絲狀的 vimentin ，這兩種型態的 vimentin 分子被用來研究苦蘵素甲（以 WA 表示）在細胞外對 vimentin 分子作用的機制；此外，進一步以電子顯微鏡觀察磷酸化作用 對 vimentin 分子結構的影響。以 50μM WA 處理四聚體 vimentin ，經 過組合反應後，形成具有側邊聚集且扭曲之絲狀結構；若以 100 μM WA 處理再經組合反應後，會形成短片段的不正常絲狀結構。若絲狀 vimentin 以不同濃度 WA 處理後，會造成絲狀 vimentin 的聚集，且愈 高的濃度下絲狀 vimentin 的聚集愈嚴重。此外，四聚體的 vimentin經 過蛋白質磷酸□ A 的磷酸化之後，無法在組合反應下形成絲狀結構；相 反地，經過蛋白質磷酸□ C 的磷酸化後，可以在組合反應下形成絲狀結 構。然而，當絲狀 vimentin 以上述兩種蛋白質磷酸□處理後， vimentin 的絲狀結構並沒有改變。絲狀的 vimentin 在 WA 存在的情況 下，磷酸化程度會有增加的情形，而且這種效應是和劑量大小有關的。綜 合上述結果，我們認為 WA 可以直接且專一性的影響 vimentin 之結構， 這種分子結構的改變，會導致四聚體 vimentin 的不正常組合，以及改變 蛋白質磷酸□ A 和蛋白質磷酸□C 對 vimentin 磷酸化的反應性。而且 WA 是首先被發現以中間型絲蛋白 vimentin 為專一標的的藥物，它的作 用可以引起絲狀 vimentin 的聚集。