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蕃茄Lehsc70-3基因之表現與啟動子分析
Thesis

蕃茄Lehsc70-3基因之表現與啟動子分析

鍾明純
Masters, 國立清華大學, 生命科學系
1995

Abstract

蕃茄 熱休克蛋白 啟動子 tomato heat shock proteins promoter
生物體在面對逆境時, 會改變生理, 生化代謝或型態,以抵抗或適應環 境, 一般認為這些變化是基因表現改變的結果. 在高溫或其他逆境下, 生 物體內原本正常合成的蛋白質會被抑制, 而同時一群被稱為熱休克蛋白( heat shock proteins, hsps ) 的蛋白質被大量誘導生成, 這即是熱休克 反應. 不同生物之熱休克蛋白的相似度很高, 顯示熱休克蛋白在演化上的 重要性. 除了高溫等逆境誘導表現外, 在正常情況下便會表現的熱休克蛋 白稱為 heat shock cognate ( hsc ).本實驗室曾經以蕃茄 Lehsc70-2 基因為探針, 自蕃茄基因庫中篩選出 Lehsc70-3, 並進行了大部分的 DNA 定序. 本篇論文的工作,除了將 Lehsc70-3的0.7 kb插入序列以及 約1.6 kb的啟動子區域完成定序並以電腦軟體分析序列特性外, 也藉由引 子延伸實驗的結果探討 Lehsc70-3於蕃茄不同器官及不同品種內的表現, 以及溫度對基因表現的影響. 同時我們也以南方轉漬法鑑定Lehsc70-3 於 蕃茄基因組中為一低數量或單一數量的基因. 最後我們並將Lehsc70-3 啟 動子幾個長短不同的區域構築於氯黴素乙醯轉移酵素( chloramphenicol acetyl transferase, CAT ) 前, 試著以電穿透 ( electroporation )方 式將重組後的質體送入植物原生質體( protoplast )中, 以期能夠了解 Lehsc70-3 啟動子的功能.

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