Abstract
N. naja atra與N. nigricollis之磷脂□A□經P-nitrobenzene sulfonyl flouride(NBSF)反應,將其中之酪胺酸予以修飾,經修飾的衍生物以高壓液相色層分析儀(HPLC)分離得到各種純一的衍生物,各種衍生物均因酪胺酸被修飾而使酵素活性大大地降低。N.naja atra之磷脂□A□經修飾後有兩種主要的衍生物––NBS–2與NBS–4。在這個酵素的九個酪胺酸中,NBS–2有一個被反應,而NBS–4有兩被修飾。以紫外光譜儀及螢光光譜儀測定得知,NBS–2與鈣離子的結合能力幾乎不變而卻喪失與ANS 的結合能力。NBS–4則兩種能力均喪失。在N.nigricollis之 磷脂□ A□中,三種主要的衍生物––NBS–2,NBS–3與NBS–4,各有1,1.4,2.7 個酪胺酸被修飾,所有的衍生物均喪失與鈣離子,ANS 的結合能力。在酪胺酸的暴露程度測驗中發現,雖然在NBS–4中被修飾的酪胺酸比NBS–2被修飾的酪胺酸之反應性弱,但卻比NBS–2中被修飾的酪胺酸更暴露於分子表面,這可能是由於反應時加入的鈣離子使酵素發生構形上的部份改變所致。