Abstract
包覆式固定化技術在動物細胞培養及製造程序上,具有增進細胞高密度生長及保護細胞象受剪應力傷害之有利條件,本研究以褐藻膠(Alginate)及聚-L- 離胺酸(p-oly-L-Lysine,間寫為PLL )為材料包覆固定化Mo12融合細胞瘤(Mo12 hybr-idoma) 以進行細胞培養及單株抗體之生產。未固化之Mo12融合細胞瘤在含高血清(10%)培養基下,生長速度及單株抗體(IgM type)產生量皆較低血清(0-5%)環境下為抉及高,且細胞在高於5×10□細胞╱ml之濃度下會有較好之生長。因此以最佳生長條件下之Mo12融合細胞瘤(存活率高於95%,細胞濃度高於5×10□細胞╱ml)之細胞進行包覆手續並進行培養。在包覆固定化後,對細胞之生長及抗體產生量加以探討,結果顯示在不斷供給10%血清條件下,以PLL 顆粒包覆者細胞濃度可達1.6×10□細胞╱ml,以褐藻膠顆粒包覆者則可達3×10□細胞╱ml之濃度。不同分子量(56000-420000)之PLL 形成之包覆膜,可限制大分子量物質之穿透,IgM 型單株抗體不會滲出包覆顆粒,而使顆粒內抗體濃度達到1560μg╱ml。包覆顆粒之機械強度,以褐藻膠較佳。但在細胞大量增長之情形下,二種材料之包覆體均發現有破裂之現象,平均可維持一星期之完整。一系列探討增進機械強度之實驗結果顯示,細胞少量生長,包覆體直徑減少或細胞數低於10□細胞╱ml之下時,可以維持兩星期大部份不破。