Abstract
用放射性標識的麩胺酸和麩胺酸受器結合的方法，在老鼠(rat) 大腦上找到一個麩胺酸受器結合位置(Glutamate Binding Sites) ，加入Ca /Cl- (2.5mM)可提高B (153 pmol/mg) 而不影響K 值(0.814 μM) ，而加入APB(2-amino-4-phosphonobutyrate)可達到80% 的抑制效果。在這裹L-APB 的K =5 μM.D-APB K =75 μM. 在更深入的研究後，一般相信這個結合位置是Cl-dependent glutamate transporter。而電生理學研究顯示有一些APB-sensitive receptor目前認為是位於presynapse的autoreceptors 。我們用豬腦做SPM (synaptic plasm membrane) 上L-[ H]glutamate 特性分析得到k=3.0+/-0.5μM, B =39+/-10pmol/(mgprotein).L-[ H]glutamate 與SPM 結合會被glutamate(K =2.4μM), L-APB(K =3.6μM), quisqualate(K =4.5μM)抑制。但DNQX(6,7-dinitro-quinoxaline-2,3dione), CNQX(6-cyano-7-nitro-quinoxa-line), NMDA(N-methyl-D-aspartate), kainate 並無抑制性。SPM 上L-[ H]APB 結合特性分析得到K =7.7+/-1.0μM, B =53+/-23pmol/(mg protein).L-[ H]APB與SPM 結合會被quisqualate(K =0.6 μM), glutamate(K =6.2μM), D, L-APB(K =1.6μM)抑制。與其它實驗室用老鼠做出來的結果類似。溶解後所得到L-glutamate binding sites 的K 值=2.36+/-0.3 μM, Bamx=22+/-0.93 pmol/(mg protein) ，而L-APB 對L-[ H]glutamate 結合的抑制常數K =0.32 μM,I =62.5%.通過Sepha-rose 6B 柱層分析及DEAE-Sepharose CL-6B柱層分析後。L-APB(7.5μM) 可以抑制L-[ H]-glutamate結合活性到81%, K =0.17μM 。