Abstract
後突觸質密區 (postsynaptic densities, 簡稱PSDs),是位於後突觸膜 (postsynaptic membrane) 下方由超過30種蛋白質所聚合而成的緊密結構。根據PSD中蛋白質的組成及所在位置,推測PSD在神經傳導 (neurotransmission)及神經可塑性 (synaptic plasticity) 等功能上扮演重要的角色。本實驗室在PSD純化的過程中加入iodoacetamide (IAA),以防止純化過程中雙硫鍵的形成。我們將純化過程加入IAA的PSD (Carboxyl-methylated PSD, 簡稱CM-PSD) 以urea (8M),NLS (3%),和NaDOC (3%) 處理後,可發現PSD完全被裂解成較小的結構。當我們以透析的方式將urea等藥劑除去後,發現這些小結構並不會重組成PSD,因此我們試著加入一些藥劑及金屬離子,模擬神經細胞內的生理環境以重組PSD。當加入金屬離子時,這些小結構會重新聚集成與PSD大小相似的結構 (Zn2+ 25 mM, Co2+ 0.25 mM, Mn2+ 1 mM, Ca2+ 1 mM, Mg2+ 2.5 mM, K+ 100 mM, 和Na+ 100 mM);而這些重組後的結構在電子顯微鏡下的構造亦與PSD相似。根據這些結果,我們推測PSD的組成蛋白質中具有與金屬離子鍵結的結構,當金屬離子與這些蛋白質鍵結後,會造成各種PSD組成蛋白質的聚集以形成PSD的次級結構,並進一步形成PSD或造成其形態上的改變。