Abstract
本研究利用二水相作為電泳介質,藉兩水相及緩衝液迴流的方法建立一套連續式管柱型的電泳裝置。在pH 約等於5時,帶正電之血紅素如預期的由下相(陽極) 往上相(陰極)移動,至 8 小時後約 60% 之血紅素自下相移動至上相,並且,隨電泳時間增長,兩相之間質傳通量會先增加而逐漸減少,最大值約在 11 毫克/(小時 -公分2)。在pH 約為 6.9時,帶負電之牛血清蛋白也如同預期的由下相(陰極)往上相(陽極)移動,在 2小時時,兩相間之質傳通量達到一最大值(約2-4 毫克/(小時-公分2) ),隨即迅速減少。在 pH 約為 7.5時,進行了血紅素與牛血清蛋白之二水相電泳實驗發現,牛血清蛋白與血紅素隨電泳自下相 (陰極)往上相(陽極 )移動,在二小時之內下相牛血清蛋白已經完全消失,在三小時內幾乎全部牛血清蛋白都在上相出現。在兩小時時平均牛血清蛋白質傳通量約為 5-7毫克/(小時-公分2),略大於緩衝液 pH 約為 6.9 、祗有牛血清蛋白質時之質傳通量。血紅素雖然亦有下相(陰極)往上相 (陽極) 移動速度,但不能與牛血清蛋白相比,在 8小時後約有 30%之血紅素自下相轉移至上相,最大通量約為 2-5 毫克/(小時-公分2),遠小於緩衝液 pH 約為 5 或 9、祗有血紅素時之質傳通量。在 pH = 5 時,同時加入血紅素與牛血清蛋白,會產生鹽析,因此無法進行電泳實驗。本實驗所建立之單一電泳管柱希望能作為擴展至多根電泳管柱電泳裝置(圖4.1 )之基礎,並利用兩相界面具有阻隔低荷電量蛋白質之概念,藉由顛倒電極之方式,發展出大規模以及高分離效率之連續式電泳裝置。