Abstract
臺灣眼鏡蛇 (Naja naja atra) 的蛇毒蛋白可粗分為三大類：神經毒素、 磷脂水解酵素以及心臟毒素。 依據蛇毒蛋白管柱層析的結果， 以心臟毒 素的含量最多，我們將其分為 CTX A1 ~ CTX A5 五種蛋白質， 他們的 胺基酸有 60 ~62 個， 分子量約為 7 Kd 。 其三級結構均為含三個 Loop的 b 板狀構造。這五種心臟毒素雖然在結構上有相當程度的同質性 ， 但是他們所引起的紅血球溶血效應以及神經磷脂小球溶液混濁度上昇 的程度卻大不相同。 本論文的重點在於使用核磁共振技術、 本質螢光、 以及圓二色光譜的測量等方法，去探討由酸鹼度變化所導致的電荷結構 改變對心臟毒素與磷脂交互作用的影響。由各個光譜滴定技術的結果，本 研究明確地指出：第一， CTX A5 在 Loop I 上的 His ，其 pKa 值在 5.5 左右；在與磷脂結合後， pKa 值會增加至 6 。 第二， CTX A5 與 磷脂的作用有明顯的酸鹼度依賴性。 第三， His 的電荷改變會帶動位 於 loop I 上的 Tyr 光譜訊號改變。這三項結果指出 CTX A5 與脂質間 交互作用的變化， 可能是來自於 ( 一 ) 脂質與帶電性胺基酸間靜電作 用力的改變， 或是 (二 ) 酸鹼度變化後帶電性胺基酸帶動了蛋白質 loop I 上構形的改變。 由於除了 His 外，不同實驗技術亦會反映出其 他的 pKa 值，顯示出可能有不只一種的帶電性胺基 酸會影響 loop I 上 構形的改變， 進而影響 CTX A5 與磷脂間的交互作用力。所以未來努力 的方向是分析更高磁場的核磁共振光譜滴定曲線， 並以各種帶電性胺基 酸的突變種來說明他們所扮演的角色。