Abstract
在動物實驗中，鉛化物會引發腫瘤。然而由流行病學的資料，仍未有充份 證據可証實鉛化物為人體致癌劑，有關鉛化物誘引哺乳類動物細胞基因突 變的研究報導正反皆有，因此吾人乃針對鉛化物的致突變性進行探討。中 國倉鼠卵巢細胞以含濃度0 至 3mM醋酸鉛之培養基處理 24小時，經細胞 毒性測試之結果顯示其存活率隨醋酸鉛濃度增高而下降，其 LD50約為 1.5mM. 將醋酸鉛處理的細胞培養七天，以進行基因突變試驗，細胞置於 含有 6-TG 之培養基內一週，可篩選出 hprt基因缺陷之突變株，突變頻 率隨著醋酸鉛之濃度增加而上升.在醋酸鉛濃度 1.5mM時，突變頻率比控 制組增高約一百三十倍，然而在 1.5至 3.0mM之間突變頻率又下降，可能 是在此濃度下對細胞之毒性過強。將單離出經培養後之突變株細胞進行 hprt基因突變之核酸序列改變分析。細胞內 mRNA 經反轉錄-聚合酵素鏈 反應 (reverse transcriptase-polymerase chain reaction；RT-PCR)於 體外大量複製 hprt cDNA,將此複製之 cDNA以 1% 凝膠 (agarose gel)分 析。共分析 115株醋酸鉛誘發之突變株，結果顯示 55株(48%)的 cDNA片 段長度與正常 cDNA長度相等，略大或略小，其餘 60株 (52%)無法以 RT- PCR方法複製出 hprt cDNA。以直接核酸定序法分析 35株複製出之突變 hprt cDNA，結果顯示了 13株(24%)為鹼基替換 (base substitution) ，20株(36%) 為訊息核酸編結突變 (splicing mutation)，2株(4%)為鹼 基缺失突變(deletion)。編結突變株則再以 genomic DNA-PCR分析，結果 顯示其外子 (exon)兩端的接受 (acceptor)或供給 (donor)位置產生單一 鹼基替換，導致在進行訊息核酸編結時發生錯誤。無法以反轉錄-聚合酵 素鏈反應複製出 hprt cDNA之突變株則利用複合聚合酵素鏈反應(mu- ltiplex DNA PCR)加以分析，結果顯示部份突變株之genomic DNA可能存 在著大段的缺失。本研究結果闡明鉛化物為一強致變劑以及其可誘發基因 大段缺失與鹼基替換。