Abstract
在哺乳類動物的金屬硫蛋白中, 離胺酸殘基具有極高的保守性. 為了瞭解 離胺酸殘基對金屬硫蛋白結構及功能的影響, 我們用基因工程的技術, 得 到金屬蛋白α功能區中三個帶正電的離胺酸殘基被置換成帶負電的麩胺酸 的突變種, 並比較其與野生種之間在光學性質上的異同. 從等電位電泳分 析得知突變種所帶的負電的確較野生種為多. 圓形二色性和紫外光譜的分 析所測得突變種蛋白質結構和野生種的差異則並不明顯. 然而在鎘113 核 磁共振光譜分析卻指出, 突變種α功能區中的金屬結合能力較低, 且α及 β功能區兩者所含金屬訊號的化學位移皆不同於野生種.在鎘113 核磁共 振的變溫實驗中又得知突變的金屬硫蛋白在β功能區中, 有明顯不同於野 生種的金屬交換狀態. 這些結果說明了將金屬硫蛋白中α功能區的離胺酸 置換成麩胺酸鹽, 雖不會明顯改變金屬硫蛋白的大體結構, 卻影響了蛋白 質中結合金屬的環境與穩定性, 且改變蛋白內的金屬交換狀態. 因此, 金 屬硫蛋白中的離胺酸, 除了有中和電性穩定結構的功能外, 可能還參與了 蛋白內金屬交換的工作.