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鋅離子參與豬腦後突觸質密區之生成
Thesis

鋅離子參與豬腦後突觸質密區之生成

鄭慧萱
Masters, National Tsing Hua University
2000

Abstract

鋅離子後突觸質密區感應耦合電漿質普分析儀
後突觸質密區(postsynaptic densities, 簡稱PSDs),是位於後突觸膜(postsynaptic membrane)下方由約超過三十多種蛋白質聚集而成的緊密結構。根據PSD的蛋白質組成與所在的位置,可推測PSD與神經傳導(neurotransmission)及神經可塑性(synaptic plasticity)有相當密切的關係。以往純化PSD的過程中會增加PSD內雙硫鍵的生成,使其整個結構緊密穩固,無法進一步以一般的化學方法分析研究其內部的組成。本實驗室在PSD純化的過程中加入iodoacetamide(IAA) (修飾PSD中的自由硫氫基;所得到的PSD稱為CM-PSD),以防止純化過程中雙硫鍵的形成。將純化後的CM-PSD以urea處理後,可將PSD完全裂解成較小的結構;當以透析的方法將urea除去後,這些因裂解而產生的小結構並不會自行重組成原來的PSD。當我們外加鋅離子後,這些小結構會重新聚集成大小與原來PSD相似的結構。利用連續性蔗糖濃度梯度(continuous sucrose density gradients)離心及蛋白生化進一步分析PSD中主要蛋白質的含量;我們也以ICP-MASS(感應耦合電漿質譜分析儀)定量方法分析得知PSD中有鋅離子的存在。而這些重組後的結構在電子顯微鏡下的構造也與CM-PSD相似。根據這些結果,可推測PSD的組成蛋白質中具有與鋅離子結合的蛋白質,當蛋白質與鋅離子鍵結後,會造成其他PSD的組成蛋白質聚集形成PSD的結構。

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