Abstract
阿黴素 (Adriamycin) 俗稱小紅莓 (Doxorubicin)，常用於癌症之化學治療。 p38有絲分裂原活化蛋白質激酶 (p38 MAPK) 是一個重要的訊號傳遞分子，因應外來逆境刺激而活化以調控細胞存亡。最近我們研究室發現，p38 MAPK 的活化可協助CL3 非小細胞肺腺癌細胞株抵抗阿黴素造成的細胞凋亡。本論文以另一株同類型的肺腺癌細胞A549延續探討阿黴素激活p38 MAPK影響細胞生長、存活及凋亡的分子機轉。西方墨點法分析顯示阿黴素誘發A549細胞p38 MAPK短暫性活化。利用MTT試驗發現p38 MAPK抑制劑SB202190 (10 □M)可加強阿黴素(0.5-1 □g/ml)降低A549細胞之存活率。細胞生長曲線及群落形成能力測試結果發現阿黴素在極低劑量(< 0.3 □g/ml)即可抑制細胞增生。SB202190可增強阿黴素誘發A549細胞caspase-3活化以及p53、磷酸化p53(Ser15)的含量。剔除p53的A549細胞在阿黴素處理後之存活率顯著高於原生型細胞，且也可被SB202190明顯降低。不論p53存在與否，SB202190皆可降低阿黴素誘發p21蛋白質含量。阿黴素明顯降低Bcl-2並增加Bax含量，此現象可被SB202190逆轉。利用RNA干擾技術抑制A549細胞p38□ 的生成，也能有效地加強阿黴素誘發p53、磷酸化p53(Ser15)並消減Bax的誘發量。相反地，以DNA轉殖技術高量表現p38□，可減低阿黴素誘發p53、磷酸化p53(Ser15)以及caspase-3活化，並且加強降低Bcl-2/Bax比例。綜合言之，本研究結果推測阿黴素誘發A549細胞之p38 MAPK訊號路徑可降低p53及caspase-3細胞凋亡因子而提升細胞存活率，然而p38 MAPK也可協助Bcl-2/Bax比例下降而引導細胞凋亡。利用非依賴p53的方式，p38 MAPK會誘發p21表現，可能因而防止細胞在遭受阿黴素損傷後進行增生，使細胞得以存活。