Abstract
近年來，對真核生物DNA 拓撲異構□的研究，多局限於較低等之生物、血球組統以及培養的細胞，我們實驗室曾經從雞紅血球細胞核中純化DNA 拓撲異構□，結果只分離出DNA 拓撲異構□Ⅰ而無DNA 拓撲異構□Ⅱ。DNA 拓撲異構□Ⅱ一般多存於細胞核中，我們認為，在造血系統的分化過程中，DNA 拓撲異構□Ⅰ與Ⅱ之間可能存在著互相消長的關係。由於紅血球為終止分裂的細胞，不具DNA 拓撲異構□Ⅱ，所以我們先用生長最迅速的雞胚胎來純化DNA 拓撲異構□，將來再用以研究此二酵素在造血系統的分化過程中所扮演的角色。完整的雞胚胎，在分離純化的過程上具有基本的困難，經過不斷改進實驗方法，我們已順利的從雞胚胎細胞核的抽取物中分離出具DNA 拓撲異構□活性的部份，其中一部分，在不需要ATP 的存在下可將pBR ３２２超螺旋型DNA 鬆開（relax） ，此應屬於DNA 拓撲異構□Ⅰ，另一個部分，則可將 P４噬菌體打結型DNA 解開（unknotting），此「解開」的過程需ATP 的參與，應屬於DNA 拓撲異構□Ⅱ。除對ATP 的需求不同外，DNA 拓撲異構□Ⅰ的鉀離子濃度為１２０mM時，有最好的酵素活性，DNA 拓撲異構□Ⅱ，則在鉀離子濃度為４０－８－mM，鎂離子濃度為２－８mM，反應酸鹼值為７時，有最好的酵素活性。將藥用植物之水抽取液以pH＝７之緩衝液稀釋１００倍，加入標準分析反應，發現對DNA 拓撲異構□Ⅰ的酵素活性（relax） 均無影響，但１２個樣品中有５－６種會完全阻斷DNA 拓撲異構□Ⅱ的酵素活性（relax ＆ unknotti-ng）。將這些植物粗粹液作用於組織培養的癌細胞，則發現能阻斷DNA 拓撲異構□Ⅱ酵素活性之樣品，對癌細胞DNA 之複製也有明顯的抑制作用。