Abstract
單細胞的研究在近年來越趨熱門,原因在於一般利用群體細胞進行的研究無法得知細胞間異質性所造成的影響,因而限制了大家對於細胞行為的了解。然而目前仍缺乏一個操作簡單又具有高通量的方法進行單細胞培養實驗。在此研究中,我們設計了一款雙微孔 (dual-well (DW)) 單細胞篩選微流晶片,能高效率 (約 77%) 地將單細胞個別抓取後置入一個大培養空間中,藉以提供足夠的空間,供細胞貼附及長時間生長。DW 晶片的設計是採用一組篩選細胞的小微孔結構對應到另一個培養細胞的大微孔結構。這個設計概念除了能大幅提昇細胞單株化培養的效率外,也讓細胞培養微孔的大小可根據實驗需求做彈性的調整,而不會影響單細胞篩選效率。我們選用小鼠神經幹細胞 KT98、人類肺癌細胞株 A549 及黑色素瘤細胞株和 MDA-MB-435 進行 DW 晶片的功能性及效率評估,以及利用 A549 進行單細胞的群落形成實驗 (single-cellcolony formation assay),來驗證 DW 晶片在單細胞長時間培養及細胞單株化應用的可行性。